Ορολογικές εξετάσεις: είδη, χρήση

Εργαστηριακή διάγνωση των σχεδόν όλων των μολυσματικών ασθενειών βασίζεται στην ανίχνευση του αίματος σε αντισώματα του ασθενούς, τα οποία παράγονται από το αντιγόνο παθογόνου, ορολογικές μεθόδους. Πήγαν στην ιατρική πρακτική στα τέλη του δέκατου ένατου - αρχές του εικοστού αιώνα.

Η ανάπτυξη της επιστήμης έχει βοηθήσει να καθορίσει την αντιγονική δομή των μικροβίων και των χημικών τύπων των τοξινών τους. Είναι δυνατή η δημιουργία όχι μόνο θεραπευτική, αλλά και διαγνωστική ορού. Αυτές λαμβάνονται με χορήγηση εξασθενημένων παθογόνων εργαστηριακά ζώα. Μετά από αρκετές ημέρες από μούλιασμα κουνελιών αίματος ή ποντίκια παρασκευαστούν προϊόντα που χρησιμοποιούνται για την ταυτοποίηση των βακτηρίων ή τις τοξίνες τους χρησιμοποιώντας ορολογικές δοκιμές.

Η εξωτερική εκδήλωση της αντιδράσεως αυτής εξαρτάται από τις συνθήκες της συνταγοποίησης του και της κατάστασης των αντιγόνων στο αίμα του ασθενούς. Εάν μικρόβια είναι αδιάλυτα σωματίδια, εγκαθίστανται, λύθηκαν, ακινητοποιημένη ή δεσμευμένη στον ορό. Εάν τα αντιγόνα είναι διαλυτά, φαίνεται το φαινόμενο της εξουδετέρωσης ή καθίζηση.

συγκόλληση (ΡΑ)

Ορολογική δοκιμή συγκόλλησης είναι πολύ συγκεκριμένες. Είναι εύκολο να εκτελέσει και είναι αρκετά σαφής για να ανιχνεύσει γρήγορα την παρουσία των αντιγόνων στον ορό του ασθενούς. Χρησιμοποιείται για τη ρύθμιση αντίδραση Vidal (διάγνωση της τυφοειδής και παράτυφο) και Weigl (τύφος).

Βασίζεται σε μια συγκεκριμένη αλληλεπίδραση μεταξύ ανθρώπινων αντισωμάτων (ή συγκολλητίνες) και μικροβιακά κύτταρα (agglyutenogenami). Μετά την αλληλεπίδρασή τους σχηματίζονται σωματίδια που καθιζάνουν. Αυτό είναι ένα θετικό σημάδι. Για τη ρύθμιση της αντίδρασης μπορεί να χρησιμοποιηθεί ζωντανό ή νεκρό μικροβιακούς παράγοντες, μύκητες, πρωτόζωα, τα κύτταρα του αίματος και σωματικών κυττάρων.

Χημική αντίδραση χωρίζεται σε δύο στάδια:

1. Ειδικά αντισώματα ένωση (ΑΤ) με αντιγόνα (Ag).
2. Η μη ειδική - η απόθεση των ομίλων AG-AT, δηλαδή το σχηματισμό της συγκολλώνται.

Αντίδραση έμμεση συγκόλληση (TPHA)

Αυτή η αντίδραση είναι πιο ευαίσθητη από την προηγούμενη. Χρησιμοποιείται για τη διάγνωση των ασθενειών που προκαλούνται από βακτήρια, ενδοκυτταρικά παράσιτα, πρωτόζωα. Είναι τόσο συγκεκριμένες που μπορεί να ανιχνεύσει ακόμη και πολύ χαμηλές συγκεντρώσεις των αντισωμάτων.

Για τυποποίηση του χρησιμοποιώντας ερυθρά αιμοσφαίρια προβάτου καθαρισμένη και των ερυθρών αιμοσφαιρίων των ανθρώπινων προκατεργασμένο με αντισώματα ή αντιγόνα (Εξαρτάται από το τι Lab θέλει να βρει). Σε ορισμένες περιπτώσεις, ανθρώπινα ερυθρά αιμοσφαίρια σε επεξεργασία με ανοσοσφαιρίνες. απόκριση ορολογική των ερυθροκυττάρων θεωρείται έγκυρη αν καταβύθιση αυτού έλαβε χώρα στον πυθμένα του σωλήνα. Η θετική αντίδραση μπορούμε να πούμε όταν τα κύτταρα διατάσσονται σε σχήμα ανεστραμμένου ομπρέλα, καταλαμβάνοντας ολόκληρο τον πυθμένα. Η αρνητική αντίδραση σημειώνεται όταν τα ερυθρά αιμοσφαίρια εγκατασταθούν στη μορφή μιας στήλης ή κουμπιά στο κέντρο του πυθμένα.

αντίδραση καθίζησης (RP)

Ορολογικές αντιδράσεις αυτού του τύπου χρησιμεύουν για την ταυτοποίηση εξαιρετικά μικρά σωματίδια αντιγόνων. Αυτό μπορεί να είναι, για παράδειγμα, πρωτεΐνες (ή τμήματα αυτών), ενώσεις πρωτεϊνών με λιπίδια ή υδατάνθρακες, μέρος των βακτηριδίων και των τοξινών τους.

Οροί για την αντίδραση λαμβάνεται με τεχνητή μόλυνση των ζώων, συνήθως κουνέλια. Σε αυτή τη μέθοδο, μπορείτε να πάρετε απολύτως καμία ορού καταβύθισης. Σταδιοποίηση ορολογική καταβύθιση παρόμοιο μηχανισμό δράσης για την συγκόλληση. Τα αντισώματα που περιέχονται στο προσδένονται σε αντιγόνα ορού στο κολλοειδές διάλυμα να σχηματίσει μεγάλα μόρια πρωτεΐνης, τα οποία αποτίθενται στον πυθμένα του σωλήνα ή επί του υποστρώματος (γέλη). Αυτή η μέθοδος θεωρείται ότι είναι εξαιρετικά ειδική και μπορεί να ανιχνεύσει ακόμη και ίχνη ποσοτήτων της ουσίας.

Χρησιμοποιείται για τη διάγνωση της πανώλης, τουλαραιμία, άνθρακα, μηνιγγίτιδα και άλλες ασθένειες. Επίσης, συμμετέχει στην ιατροδικαστική εξέταση.

δοκιμή καταβύθιση Gel

Ορολογικές δοκιμές μπορούν να πραγματοποιηθούν όχι μόνο σε ένα υγρό μέσο, αλλά στην πηκτή αγαρόζης. Αυτό ονομάζεται διάχυτη μέθοδο καταβύθισης. Με αυτό, μελετούν τη σύνθεση του συμπλόκου αντιγονικού μιγμάτων. Αυτή η μέθοδος βασίζεται στην χημειοταξία των αντιγόνων σε αντισώματα, και αντίστροφα. Το πήκτωμα κινούνται το ένα προς το άλλο σε διαφορετικές ταχύτητες και συνάντηση για να σχηματίσουν γραμμές καταβύθισης. Κάθε γραμμή - ένα σύνολο K-AT.

Εξουδετέρωση εξωτοξίνη αντιτοξίνης (RN)

Αντιτοξικά ορού μπορούν να εξουδετερώσουν εξωτοξίνη που παράγουν μικροοργανισμούς. Με βάση αυτά τα δεδομένα και ορολογικών δοκιμών. Μικροβιολογία χρησιμοποιεί αυτή τη μέθοδο για την τιτλοδότηση των ορών, τοξίνες και τοξοειδή, καθώς επίσης και θεραπευτική τους δραστικότητα. Η αντοχή της εξουδετέρωσης της τοξίνης προσδιορίζεται από τις συμβατικές μονάδες - ΑΕ.

Επιπλέον, λόγω αυτής της αντίδρασης μπορεί να προσδιορίσει τα είδη ή τους τύπους που ανήκουν εξωτοξίνη. Χρησιμοποιείται στη διάγνωση του τετάνου, της διφθερίτιδας, αλλαντίαση. Η μελέτη μπορεί να διεξαχθεί «στη γυάλινη επιφάνεια», και σε ένα πήκτωμα.

αντίδραση λύσης (RL)

Το ανοσοποιητικό ορό, η οποία εισέρχεται στο σώμα του ασθενούς, έχει, εκτός από την κύρια λειτουργία του της παθητικής ανοσίας, ακόμη και λυτική ιδιότητες. Είναι σε θέση να διαλύει μικροβιακών παραγόντων, κυτταρικών και ξένα στοιχεία ιός εισέρχεται στο σώμα του ασθενούς. Ανάλογα με την ειδικότητα των αντισωμάτων που περιλαμβάνονται στον ορό απομονώνονται bactericidin, κυτταρολυσίνες, spirohetoliziny, αιμολυσίνες και άλλα.

Αυτά τα ειδικά αντισώματα που ονομάζεται «συμπλήρωμα». Βρίσκεται σε όλα σχεδόν τα σωματικά υγρά, αυτό έχει μια σύνθετη δομή των πρωτεϊνών και είναι πολύ ευαίσθητος σε αύξηση της θερμοκρασίας, ανακινήθηκε, οξέα και το άμεσο ηλιακό φως. Όμως, στην αποξηραμένη κατάσταση είναι σε θέση να διατηρήσει λυτική ιδιότητές τους μέχρι έξι μήνες.

Υπάρχουν μερικά είδη ορολογικών δοκιμών αυτού του τύπου:

- βακτηριόλυση?

- αιμόλυση.

Βακτηριόλυση διεξάγεται χρησιμοποιώντας ορό του αίματος του ασθενούς και ειδική ανοσολογική ορού με ζωντανά μικρόβια. Εάν, τότε ο ερευνητής βλέπει την λύση των βακτηριδίων, και η απόκριση θα θεωρείται ως ένας επαρκής αριθμός θετικών συμπληρώματος είναι παρούσα στο αίμα.

Η δεύτερη απόκριση ορολογική αίματος είναι ότι η αναστολή των ερυθροκυττάρων αγωγή ασθενούς αιμολυσίνες ορό που περιέχει, τα οποία ενεργοποιούνται μόνο παρουσία ενός συγκεκριμένου φιλοφρόνηση. Αν υπάρχει, τότε το εργαστήριο βλέποντας τη διάλυση των ερυθρών αιμοσφαιρίων. Αυτή η αντίδραση χρησιμοποιείται ευρέως στην σύγχρονη ιατρική για να προσδιορισθεί ο τίτλος του συμπληρώματος (δηλαδή, μικρότερο ποσό του προκαλώντας λύση των ερυθρών αιμοσφαιρίων) στον ορό του αίματος και για την παραγωγή της δοκιμασίας σύνδεσης συμπληρώματος. Ήταν με αυτόν τον τρόπο διεξάγεται ορολογική αντίδραση για σύφιλη - Wasserman.

συμπληρώματος στερέωσης (RSK)

Αυτή η αντίδραση χρησιμοποιείται για την ανίχνευση αντισωμάτων στον ορό στον ασθενή ενός μολυσματικού παράγοντα, καθώς και για την ταυτοποίηση του εντολέα της αντιγονική δομή της.

Μέχρι αυτό το σημείο έχουμε περιγράψει ένα απλό ορολογικές εξετάσεις. RAC θεωρείται δύσκολη αντίδραση, δεδομένου ότι αλληλεπιδρούν όχι δύο, αλλά τρία στοιχεία: ένα αντίσωμα, ένα αντιγόνο και συμπλήρωμα. Η ουσία της έγκειται στο γεγονός ότι η αλληλεπίδραση μεταξύ του αντισώματος και του αντιγόνου λαμβάνει χώρα μόνο με την παρουσία των πρωτεϊνών επαινέσει οποία προσροφώνται επί της επιφανείας του σχηματιζόμενου συμπλόκου Κ-ΑΤ.

Οι ίδιοι αντιγόνα μετά την προσθήκη του συμπληρώματος, υπόκειται σε σημαντικές αλλαγές, που δείχνουν την ποιότητα της αντίδρασης. Αυτό μπορεί να είναι η λύση, αιμόλυση, ακινητοποίηση, βακτηριοκτόνο ή βακτηριοστατική δράση.

Η ίδια η αντίδραση λαμβάνει χώρα σε δύο φάσεις:

1. Ο σχηματισμός του αντισώματος-αντιγόνου, το οποίο δεν είναι οπτικά αισθητή ερευνητής.
2. Αλλάζοντας το αντιγόνο υπό τη δράση του συμπληρώματος. Αυτή η φάση συνήθως μπορεί να εντοπιστεί με γυμνό μάτι. Αν η οπτική απόκριση δεν είναι ορατό, στη συνέχεια, χρησιμοποιήστε το πρόσθετο σύστημα δείκτη που επιτρέπει την ανίχνευση μεταβολών.

συστήματος δεικτών

Αυτή η αντίδραση βασίζεται στην δέσμευση του συμπληρώματος. Οι δοκιμαστικοί σωλήνες ώρα μετά τη ρύθμιση RSK προστέθηκε καθαρισμένο ερυθροκύτταρα προβάτου και αιμολυτική ορού που δεν περιέχει συμπλήρωμα. Εάν ο σωλήνας αφέθηκε μη δεσμευμένο συμπληρώματος, θα ενταχθεί το σύμπλοκο Ν-ΑΤ που σχηματίζονται μεταξύ των κυττάρων αίματος προβάτου και αιμολυσίνη, και να προκαλέσει τη διάλυση τους. Αυτό θα σήμαινε ότι η DGC είναι αρνητική. Αν τα ερυθρά αιμοσφαίρια παρέμειναν ανέπαφα, στη συνέχεια, κατά συνέπεια, η αντίδραση είναι θετική.

αιμοσυγκόλλησης (RHA)

Υπάρχουν δύο ριζικά διαφορετικές αιμασυσσωμάτωση. Ένας από αυτούς - ορολογική, χρησιμοποιείται για τον προσδιορισμό των ομάδων αίματος. Στην περίπτωση αυτή, τα ερυθροκύτταρα αλληλεπιδρούν με τα αντισώματα.

Και η δεύτερη αντίδραση δεν σχετίζεται με ορολογική, δεδομένου ότι τα ερυθρά αιμοσφαίρια αντιδρούν με αιμοσυγκολλητίνη που παράγονται από ιούς. Δεδομένου ότι κάθε διεγέρτη ενεργεί μόνο σε συγκεκριμένες ερυθροκύτταρα (κοτόπουλο, τα πρόβατα, πιθήκους), μπορούμε να υποθέσουμε αυτή η αντίδραση στενά ειδικός.

Εκκαθάριση θετική ή αρνητική απόκριση, είναι δυνατό για τη θέση των κυττάρων του αίματος στον πυθμένα του σωλήνα. Εάν σχήμα μοιάζει με ένα ανεστραμμένο ομπρέλα, τότε η επιθυμητή ιός είναι παρών στο αίμα του ασθενούς. Και αν όλα τα ερυθρά αιμοσφαίρια διαμορφώνεται σαν ένα στήλες νομισμάτων, δεν υπάρχουν άγνωστα παθογόνα.

Αντίδραση της αναστολής αιμοσυγκολλητίνης (ΗΑΙ)

Αυτή η εξαιρετικά ειδική αντίδραση, η οποία επιτρέπει να καθοριστεί η μορφή, τον τύπο του ιού ή την παρουσία των ειδικών αντισωμάτων στον ορό του αίματος του ασθενούς.

Η ουσία της έγκειται στο γεγονός ότι τα αντισώματα προστίθενται στο σωλήνα που περιέχει το υλικό δοκιμής, αποτρέπει την εναπόθεση των αντιγόνων στα ερυθροκύτταρα, σταματώντας έτσι αιμοσυγκόλλησης. Αυτή είναι μία ποιοτική ένδειξη της παρουσίας των ειδικών αντιγόνων στο αίμα σε ένα συγκεκριμένο επιθυμητό ιού.

ανοσοφθορισμού Αντίδραση (RIF)

Η αντίδραση βασίζεται στην ικανότητα να εντοπίσει σύμπλοκα με ΑΤ-ΑΗ μικροσκοπία φθορισμού μετά βαφές flyuorohromnymi θεραπεία. Αυτή η μέθοδος είναι απλή στη χρήση, δεν απαιτεί την απομόνωση της καθαρής καλλιέργειας και διαρκεί λίγο χρόνο. Είναι απαραίτητη για την ταχεία διάγνωση των μολυσματικών ασθενειών.

Στην πράξη, αυτές οι ορολογικές εξετάσεις χωρίζονται σε δύο κατηγορίες: άμεσες και έμμεσες.

Απευθείας RIF παράγεται αντιγόνο το οποίο προηγουμένως σε επεξεργασία φθορισμού ορού. Και έμμεσες είναι ότι το φάρμακο πρώτα υποβάλλεται σε επεξεργασία με συμβατικές diagnosticum που περιλαμβάνει αντισώματα προς το επιθυμητό αντιγόνο και στη συνέχεια εκ νέου εφαρμόστηκε φθορισμού ορού γάλακτος, η οποία είναι ειδικά για τις πρωτείνες του συμπλόκου Κ-ΑΤ, και μικροβιακά κύτταρα γίνονται ορατά με μικροσκοπία.