Μικροβιολογικές μέθοδοι για τη μελέτη των υδάτων, του εδάφους και του αέρα

Μικροοργανισμοί - μικρό, ως επί το πλείστον μονοκύτταροι πλάσματα, τα οποία είναι ευρέως διαδεδομένα στη φύση. Βρίσκονται σε όλα τα μέσα (αέρας, έδαφος, νερό) σε ανθρώπους και ζώα, σε φυτά.

Ποιοτική ποικιλία και αριθμός των οργανισμών εξαρτώνται κυρίως από θρεπτικές ενώσεις. Αλλά είναι επίσης σημαντικό, όπως η υγρασία, η θερμοκρασία, ο αερισμός και η δράση του ηλιακού φωτός και άλλους παράγοντες.

природных сред позволяют выявить наличие патогенных микроорганизмов, определить их количество и, в соответствии с полученными результатами, выработать меры по устранению или предупреждению инфекционных заболеваний. Μέθοδοι για υγειονομικούς και μικροβιολογικές μελέτες φυσικών μέσων μπορεί να ανιχνεύσει την παρουσία των παθογόνων και να καθορίσει το ύψος τους, σύμφωνα με τα αποτελέσματα που λαμβάνονται, να αναπτύξει μέτρα για την εξάλειψη ή την πρόληψη μολυσματικών ασθενειών. Επιπλέον, ποσοτικά λογαριασμό είναι απαραίτητη για την μοντελοποίηση του οικοσυστήματος και την ανάπτυξη των φυσικών διεργασιών διακυβέρνησης. . Ας εξετάσει περαιτέρω ποιες είναι οι μέθοδοι μικροβιολογική εξέταση.

χώμα

Θεωρείται από τους μελετητές ως μία από τις πιθανές οδούς μετάδοσης μολυσματικών παθολογικών καταστάσεων. Με εκκρίσεις άνθρωπο ή ζώο ασθενή που παθογόνων εδάφους διεισδυτική. Μερικά από αυτά, ιδίως, σπορίων, μπορεί να παραμείνουν στο έδαφος για μεγάλο χρονικό διάστημα (μερικές φορές για δεκαετίες). позволяют определить "микробное число" (кол-во микроорганизмов в грамме грунта), а также коли-индекс (количество кишечных палочек). Τα παθογόνα πτώση χώματος έτσι επικίνδυνες λοιμώξεις όπως τέτανος, άνθραξ, αλλαντίαση, και ούτω καθεξής. Μέθοδοι υγιεινής-μικροβιολογική μελέτη του εδάφους επιτρέπουν να οριστεί η «μικροβιακό φορτίο» (τον αριθμό των μικροοργανισμών στο έδαφος του γραμμαρίου), και coli δείκτης (ο αριθμός των E. coli) .

Ανάλυση εδάφους: μια επισκόπηση

следует в первую очередь отнести прямое микроскопирование и посев на плотную питательную среду. Μέθοδοι για μικροβιολογική εξέταση του εδάφους θα πρέπει να αποδοθεί κατά κύριο λόγο άμεση μικροσκόπηση και καλλιέργεια σε στερεό θρεπτικό μέσο. Οι πληθυσμοί των μικροοργανισμών και των ομάδων τους που κατοικούν στο έδαφος, διαφέρουν ως προς την συστηματική κατάταξη και οικολογικές λειτουργίες. Στην επιστήμη, είναι ενωμένοι κάτω από τον γενικό όρο «βιόκοσμο του εδάφους.» Primer - βιότοπος τεράστιο αριθμό των μικροοργανισμών. Σε γραμμάριο εδάφους είναι παρούσα από 1 έως 10 δισεκατομμύρια κυττάρων τους. Σε αυτό το περιβάλλον, συμμετέχει ενεργά αποσύνθεση της οργανικής ύλης, με τη συμμετοχή των διαφόρων σαπροφυτικών μικροοργανισμών.

Μικροσκοπική μελέτες της μικροβιολογικής μεθόδου: τα βήματα

Ανάλυση του μέσου αρχίζει με τη δειγματοληψία. Για το σκοπό αυτό, στο παρελθόν αποφλοιωμένες και (μπορεί να χρησιμοποιηθεί φτυάρι) τριμμένο αλκοόλη μαχαίρι. Μετά από αυτό, η προετοιμασία του δείγματος. Το επόμενο βήμα - μετράνε κύτταρα βάφονται επιχρίσματα. Εξετάστε κάθε βήμα ξεχωριστά.

δειγματοληψία

Στην ανάλυση των γεωργικών εδαφών τείνουν δείγμα που λαμβάνεται από ένα βάθος ολόκληρης της στρώσης. Πρώτα αφαιρείται 2-3 cm πάνω από το έδαφος, καθώς μπορεί να είναι παρόντες σε ένα εξωγενές μικροχλωρίδα. Στη συνέχεια, με έκταση εδάφους μελετήθηκε λάβει μονόλιθους. Το μήκος της κάθε μία από αυτές πρέπει να συμμορφώνονται με το πάχος του στρώματος από το οποίο θέλετε να δοκιμάσετε.

Σε οικόπεδο 100-200 τετραγωνικά. 7-10 m επιλεγμένα δείγματα. Το βάρος της κάθε - της τάξεως των 0,5 kg. Τα δείγματα πρέπει να αναμιχθούν καλά στην τσάντα. Μετά πάρτε το μέσο δείγμα βάρους περίπου 1 kg. Θα πρέπει να τοποθετούνται σε περγαμηνή (στείρο) συσκευασία περικλείεται σε μια τσάντα πανί. Πριν από την άμεση ανάλυση του δείγματος που αποθηκεύονται στο ψυγείο.

Έρευνα Παρασκευή

Το αναδευόμενο χώμα χύνεται σε στεγνό γυαλί. Της προ-σκουπίστε με οινόπνευμα και να κάψετε πάνω από τον καυστήρα. Με εδάφους σπάτουλα αναμιγνύονται πλήρως και επεκτάθηκε ομοιόμορφα. Είναι υποχρεωτικό να αφαιρέσει τις ρίζες και άλλα ξένα στοιχεία. Για να το κάνετε αυτό, χρησιμοποιήστε τσιμπιδάκια. Πριν τσιμπιδάκια τη λειτουργία και τη σπάτουλα πάνω από τον καυστήρα αναφλέγεται και αφήνεται να κρυώσει.

Από τα διάφορα αγροτεμάχια εδάφους διανέμονται στη γυάλινη επιφάνεια, επιλεγμένα μικρές μερίδες. Θα ζυγίζονται σε ένα πιάτο από πορσελάνη σε τεχνικό επίπεδο. является специальная обработка образца. Υποχρεωτική βήμα μικροσκοπική μέθοδος μικροβιολογικές μελέτες είναι η ειδική επεξεργασία του δείγματος. 2 πρέπει να προετοιμάζονται εκ των προτέρων, αποστειρωμένη φιάλη. Το μέγεθος τους δεν πρέπει να υπερβαίνει τα 250 ml. Μία από τις φιάλες χύνεται σε 100 ml νερού βρύσης. Επειδή χρειάζεται 0.4-0.8 ml υγρό δείγμα χώματος και υγραίνεται σε μια πάστα. Το μίγμα θα πρέπει να τρίβονται με ένα δάχτυλο ή καουτσούκ γουδοχέρι για 5 λεπτά.

Το νερό από την πρώτη φιάλη μεταφέρθηκαν στην μάζα του εδάφους άδειο φιάλη. Περαιτέρω, τρίβει την πλάτη της. Μετά από αυτό μάζα μεταφέρεται σε μία φιάλη πλησίον του φλόγα του καυστήρα. Δοχείο με εναιώρημα χώμα ανακινήθηκε σε συσκευή ανακίνησης για 5 λεπτά. Στη συνέχεια, αφέθηκε να κατακαθίσει για περίπου 30 δευτερόλεπτα. Αυτό είναι απαραίτητο προκειμένου να καταστεί δυνατή μεγάλα σωματίδια να καθιζάνουν. Μετά μισό μάζα λεπτό χρησιμοποιείται για την παρασκευή του παρασκευάσματος.

Οι αριθμοί κυττάρων σε σταθερά επιχρίσματα

, разработанному Виноградским. Άμεση μικροσκοπική μελέτη του εδάφους διεξάγεται με τη μέθοδο των μικροβιολογικές μελέτες, αναπτύχθηκαν Vinogradskii. Σε ορισμένες όγκος του εναιωρήματος μετρήθηκε ο αριθμός των κυττάρων των μικροοργανισμών. Μελετώντας σταθερό κηλίδες μπορεί να αποθηκεύσει τα ναρκωτικά σε μακροπρόθεσμη βάση και να εκτελούν υπολογισμούς ανά πάσα στιγμή.

Προετοιμασία του φαρμάκου ως ακολούθως. Μια ορισμένη ποσότητα του πολτού (τυπικά 0,02-0,05 ml) εφαρμόζεται με μια μικροπιπέτα επί του ολισθητήρα. Σε αυτό το διάλυμα προστέθηκε μια σταγόνα άγαρ-άγαρ (πολυσακχαρίτης αγαροπηκτίνη μίγμα και εκχυλίζεται αγαρόζης από καφέ και κόκκινα άλγη Μαύρη Θάλασσα), αναδεύτηκε ταχέως και απλώνονται πάνω από μια περιοχή 4-6 τετραγωνικά. cm. Pap ξηραίνονται στον αέρα και σταθεροποιήθηκαν για 20-30 λεπτά. αλκοόλη (96%). Στη συνέχεια, το φάρμακο εμποτισμένο με απεσταγμένο νερό και τοποθετήθηκε σε ρ-ρ καρβολικό ερυθροσίνη 20-30 min.

Μετά τη χρώση, πλένεται και ξηραίνεται στον αέρα. Οι αριθμοί κυττάρων που εκτελούνται από το φακό εμβάπτισης.

Σπορά σε στερεά υλικά

позволяют выявить большое количество микроорганизмов. Μικροσκοπικές μέθοδοι για μικροβιολογική εξέταση μπορεί να εντοπίσει ένα μεγάλο αριθμό μικροοργανισμών. Όμως, παρά αυτή, η μέθοδος του εμβολιασμού είναι η πιο κοινή πρακτική. Η ουσία του συνίσταται στην σπορά ποσότητα του φαρμάκου (εναιώρημα έδαφος) σε ένα τρυβλίο Petri σε ένα στερεό μέσο.

позволяет учитывать не только количество, но и групповой, а в ряде случаев и видовой состав микроскопической флоры. Αυτή η μέθοδος μικροβιολογική έρευνα λαμβάνει υπόψη όχι μόνο την ποσότητα αλλά και την ομάδα, και σε ορισμένες περιπτώσεις, και τη σύνθεση των ειδών των μικροσκοπικών χλωρίδας. Μετρώντας τον αριθμό των αποικιών που παράγονται, συνήθως από τον πυθμένα του τρυβλίου Petri σε μεταδιδόμενο φως. Από την υπολογισμένη περιοχή τοποθετείται ένα δείκτη ή μελάνι τελεία.

Ανάλυση του νερού

Η μικροχλωρίδα του σώματος του νερού, κατά κανόνα, αντικατοπτρίζει τη μικροβιακή σύσταση του εδάφους γύρω από αυτό. имеют особое практическое значение при изучении состояния конкретной экосистемы. Σε αυτό το πλαίσιο, οι μέθοδοι υγιεινής-μικροβιολογική ανάλυση των υδάτων και του εδάφους έχουν ιδιαίτερη πρακτική σημασία στη μελέτη της κατάστασης ενός συγκεκριμένου οικοσυστήματος. Το φρέσκο νερό περιέχει, κατά κανόνα, κόκκοι, ραβδόμορφα βακτήρια.

Αναερόβιων σε νερό βρίσκεται σε μικρές ποσότητες. Κατά κανόνα, πολλαπλασιάζονται στο κάτω μέρος των οργάνων του νερού, στη λάσπη, λαμβάνοντας μέρος στη διαδικασία του καθαρισμού. ωκεανούς μικροχλωρίδα και τις θάλασσες πλεονεκτικά αντιπροσωπεύονται αλοφυτικές (αλόφιλα) βακτήρια.

Στο νερό, αρτεσιανό πηγάδια είναι σχεδόν κανένα μικροοργανισμοί. Αυτό οφείλεται στην ικανότητα φιλτραρίσματος του στρώματος χώματος.

считаются определение микробного числа и коли-титра либо коли-индекса. Οι συμβατικές μέθοδοι της μικροβιολογικής έρευνας για το νερό θεωρείται με τον ορισμό της δείκτη αν-μικροβιακή και coli-τίτλος ή. Ο πρώτος δείκτης ορίζει τον αριθμό των βακτηρίων σε 1 ml υγρού. δείκτης Coli αντιπροσωπεύει τον αριθμό των κολοβακτηριδίων που υπάρχουν σε ένα λίτρο νερό, και αν ο τίτλος - τον ελάχιστο αριθμό ή ανώτατο υγρού αραίωσης στο οποίο μπορούν ακόμα να ανιχνευθούν.

Προσδιορισμός του μικροβιακού αριθμό

Αυτή η μέθοδος υγιεινής μικροβιολογική εξέταση του νερού έχει ως εξής. Σε 1 ml του ύδατος προσδιορίζεται αριθμός των μεσόφιλων και προαιρετικά αναερόβιων (ενδιάμεσο) αερόβια ικανό σε άγαρ κρέας-πεπτόνης (πρωτεύον μέσο) στους 37 ° C. κατά τη διάρκεια της ημέρας για να σχηματίσουν αποικίες ορατές σε μεγέθυνση 2-5 σελ. ή το γυμνό μάτι.

является посев. Το στάδιο κλειδί της μεθόδου της μικροβιολογική ανάλυση του νερού σπέρνεται. Επειδή κάθε δείγμα σπείρεται τουλάχιστον 2 διαφορετικούς όγκους. Οταν η ανάλυση του νερού της βρύσης σε κάθε κύπελλο είναι κατασκευασμένο από 1 έως 0,1 ml καθαρού υγρού και του μολυσμένου 0,01 έως 0,001 ml. Για τον εμβολιασμό των 0,1 ml ή μικρότερο όγκο του ρευστού αραιώνεται με απεσταγμένο (στείρο) νερό. Σταθερά παρασκευάζονται δεκαδικές αραιώσεις. 1 ml από καθένα από αυτά γίνεται σε δύο δισκία petri.

ΑΝΑΠΑΡΑΓΩΓΗΣ γεμάτο με θρεπτικό άγαρ. Θα πρέπει πρώτα να λιώσει, και δροσερό έως 45 βαθμούς. Μετά από ανάδευση, το δραστικό μέσον αφήνεται επί οριζοντίου επιφανείας για στερεοποίηση. Στο 37 βαθμούς. Οι καλλιέργειες διάρκεια της ημέρας. позволяет учитывать результаты на тех чашках, где количество колоний находится в пределах от 30 до 300. Η εξέτασε μέθοδος της μικροβιολογική έρευνα νερού λαμβάνει υπόψη τα αποτελέσματα των εν λόγω πιάτων, όπου ο αριθμός των αποικιών στο εύρος από 30 έως 300.

αέρας

Θεωρείται διέλευσης έδαφος για τους μικροοργανισμούς. являются седиментация (оседание) и аспирация. Οι κύριες μέθοδοι της μικροβιολογικές μελέτες είναι καθίζησης αέρα (καθίζησης) και αναρρόφηση.

Μικροχλωρίδα περιβάλλον αέρας αυθαίρετα χωρίζεται σε μεταβλητές και σταθερές. Η πρώτη ομάδα περιλαμβάνει ζυμομύκητες, χρωμογόνα κόκκοι, σπορίων που φέρουν βάκιλο coli και άλλων μικροοργανισμών που είναι ανθεκτικοί σε ξήρανση, έκθεση στο φως. Εκπρόσωποι μεταβλητή μικροχλωρίδα, που εισχωρεί στον αέρα από συνήθη βιότοπο τους, μακρύ διατηρούν τη ζωτικότητά τους.

Στον αέρα των μεγάλων πόλεων μικροοργανισμούς πολύ περισσότερο από ό, τι στο περιβάλλον αέρα των αγροτικών περιοχών. Πάνω από τις θάλασσες, τα δάση είναι πολύ λίγα τα βακτήρια. Ο καθαρισμός του αέρα διευκολύνει καταβύθιση: χιόνι και τη βροχή. Στους εσωτερικούς χώρους μικρόβια πολύ περισσότερο από ό, τι σε ανοιχτούς χώρους. Ο αριθμός τους αυξάνεται το χειμώνα με την απουσία των τακτικών εξαερισμού.

καθίζηση

считается простейшим. Αυτή η μέθοδος της μικροβιολογικής έρευνας στη μικροβιολογία θεωρείται ότι είναι το πιο απλό. Βασίζεται στη διευθέτηση των σταγονιδίων και σωματιδίων στην επιφάνεια του άγαρ σε ανοικτό τρυβλίο Petri υπό βαρύτητα. μέθοδο ιζηματογένεσης δεν μπορεί να προσδιορίσει με ακρίβεια τον αριθμό των βακτηρίων στον αέρα. Το γεγονός είναι ότι σε ανοικτό δοχείο για να πιάσει το λεπτό κλάσμα των σωματιδίων σκόνης και σταγονιδίων των βακτηριακών αρκετά δύσκολο. Στην επιφάνεια που διατηρούνται κυρίως μεγάλα σωματίδια.

Αυτή η μέθοδος δεν χρησιμοποιείται για την ανάλυση του αέρα. Αυτό το περιβάλλον που χαρακτηρίζεται από μεγάλες διακυμάνσεις στην ταχύτητα της ροής του αέρα. Καθίζηση μπορεί, ωστόσο, να χρησιμοποιηθούν υπό την απουσία πιο εξελιγμένες συσκευές ή ηλεκτρική πηγή ισχύος.

Ο προσδιορισμός του αριθμού των μικροβιακών εκτελούνται με τη μέθοδο Omelyansky. Σύμφωνα με αυτά, για 5 λεπτά σε μια έκταση επιφανείας 100 τετραγωνικών άγαρ. cm διευθετεί ένας αριθμός των βακτηρίων είναι παρούσα σε 10 λίτρα αέρα.

Παραγγελία 535 «Με την ενοποίηση των μικροβιολογικών μεθόδων έρευνας»

Βακτηριολογική ανάλυση κατέχει σημαντική θέση στις πολύπλοκες κλινικές και εργαστηριακές δραστηριότητες που αποσκοπούν στην διάγνωση, πρόληψη και θεραπεία διαφόρων μολυσματικών ασθενειών. Ωστόσο, η μελέτη του περιβάλλοντος, που δεν περιορίζεται.

Ιδιαίτερης σημασίας είναι η βακτηριολογική ανάλυση βιολογικού υλικού στα νοσοκομεία. Για την έρευνα που διεξήχθη στις εγκαταστάσεις της υγείας, αυξημένες απαιτήσεις. Ο σκοπός του Τάγματος «Με την ενοποίηση των μικροβιολογικών μεθόδων έρευνας» είναι να βελτιωθεί η βακτηριολογική ανάλυση, τη βελτίωση της ποιότητας και της αποτελεσματικότητας των μικροβιολογικών διαγνωστικών.

Η μικροσκοπική εξέταση των επιχρισμάτων στις γυναίκες

Αποτελεί βασικό μέθοδος ανάλυσης για τη διάγνωση των λοιμώξεων, σεξουαλικώς μεταδιδόμενες λοιμώξεις, και ευκαιριακές λοιμώξεις (ευκαιριακές βακτήρια).

Μικροσκοπική ανάλυση για να αξιολογηθεί η ποιοτική και ποσοτική σύνθεση της μικροχλωρίδας, ελέγχει την ορθότητα των δειγματοληψίας. Για παράδειγμα, η παρουσία του κολπικού επιθηλίου σε επιχρίσματα που λαμβάνονται από αυλού του τραχήλου υποδεικνύει μια παραβίαση των κανόνων της επιλογής ενός βιολογικού δείγματος.

Λέγεται ότι η μικροβιολογική εξέταση σε αυτή την περίπτωση είναι γενικά ακολουθείται από κάποια προβλήματα. Έχουν σχέση με το γεγονός ότι στην κάτω γεννητική οδό είναι κανονικά παρόν ένα ποικίλο μικροχλωρίδα που ποικίλλει σε διαφορετικές ηλικίες. Για να βελτιωθεί η αποτελεσματικότητα της έρευνας και έχουν αναπτύξει τυποποιημένους κανόνες.

Διάγνωση των ιογενών λοιμώξεων

Είναι διεξάγεται με μεθόδους ανίχνευσης παθογόνων RNA και DNA. Βασίζονται κυρίως στον προσδιορισμό των νουκλεοτιδικών αλληλουχιών σε παθολογικό υλικό. Για το σκοπό αυτό, οι μοριακοί ανιχνευτές. Έχουν τεχνητά παραγόμενες νουκλεϊκά οξέα συμπληρωματικά με (συμπληρωματικό προς) τα ιικά οξέα επισημασμένα με ένα ραδιενεργό ετικέτα ή βιοτίνη.

Η ιδιαιτερότητα της μεθόδου επαναλαμβάνεται αντιγραφή του ειδικού θραύσματος DNA που περιέχει μερικές εκατοντάδες (ή δεκάδες) νουκλεοτίδιο ζεύγη. αναδιπλασιασμού (αντιγραφής) είναι ότι επέκταση μπορεί να αρχίσει μόνο σε ορισμένες μονάδες. εκκινητές (ενάρκτες) που χρησιμοποιούνται για τη δημιουργία τους. Αυτά συντίθενται ολιγονουκλεοτίδια.

PCR διαγνωστικά (αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης) είναι απλή σε εκτέλεση. Αυτή η μέθοδος σας επιτρέπει να πάρετε γρήγορα το αποτέλεσμα με μια μικρή ποσότητα παθολογικό υλικό. Χρησιμοποιώντας τα διαγνωστικά PCR προσδιορίζει οξείες, χρόνιες και λανθάνουσα (hidden) λοιμώξεις.

Όταν η ευαισθησία αυτής της μεθόδου θεωρείται πιο προτιμότερη. Ωστόσο, τα τρέχοντα συστήματα δοκιμών δεν είναι αξιόπιστες αρκετά, έτσι ώστε η PCR διάγνωση δεν μπορεί να αντικαταστήσει πλήρως τις παραδοσιακές μεθόδους.