Μέσο Ploskireva (Bacto-άγαρ F): περιγραφή. ιατρική μικροβιολογία

μέσο Ploskireva (εφεξής ακόμα άγαρ Bacto F) είναι ένα θρεπτικό μέσο για την καλλιέργεια ορισμένων μικροοργανισμών, κυρίως Shigella και Salmonella. Ως πηγή για τη χρήση υλικών της έχουν μολυνθεί: ούρα, χολή, κόπρανα.

ιστορία

Νικολάι Ιβάνοβιτς Ploskirev - Σοβιετική μικροβιολόγος και Τιμήθηκε ο γιατρός. Γεννήθηκε το 1869 και πέθανε το 1948, έχοντας εργαστεί μεγαλύτερο μέρος της ζωής του στη γενέτειρά του - Τομσκ.

Το 1888, ο ίδιος, το μέλλον επιστήμονα, χωρίς την ολοκλήρωση της έκτης τάξης του σχολείου, προσχώρησε στο στρατό. ήταν σε θέση να ολοκληρώσει την εκπαίδευση μόνο το 1892, στη συνέχεια πέρασε τις εξετάσεις για την εισαγωγή στο Imperial Τομσκ Πανεπιστημίου, σπούδασε στην Ιατρική Σχολή. Το 1898 έλαβε τον τίτλο του γιατρού.

Ploskirev συμμετείχε στην ρωσο-ιαπωνικό πόλεμο, και αφού εργάστηκε στο νοσοκομείο Τομσκ. Το 1910 διορίστηκε στη θέση του επικεφαλής της Τομσκ δερματολογικών και αφροδίσιων νοσοκομείο, και εδώ και τριάντα χρόνια έχει μόνιμη κεφάλι του. Ο ίδιος επιστήμονας ήταν ένας από τους ιδρυτές της STI κλινική στο Τομσκ.

Νικολάι Ιβάνοβιτς Ploskirev έγραψε μια σειρά έργων αφιερωμένη στην καταπολέμηση της αφροδίσια νοσήματα.

δομή

Τετάρτη Ploskireva - υλικό για την καλλιέργεια των εντερικών βακτηρίων και, ως εκ τούτου, πρέπει να περιέχει διάφορα είδη των θρεπτικών ουσιών. Παράγεται σε ξηρή μορφή.

Αρκετά μεγάλο ποσοστό του συνολικού βάρους του είναι παγκρεατική υδρόλυμα παπαλίνα (10.4 g / l). Ελαφρώς λιγότερο αντιπροσώπευαν hydrocitrate διβασικό νάτριο (8,5 g / l). Επίσης υπάρχει ένα ξηρό θρεπτικό ζωμό και το σάκχαρο του γάλακτος (8,62 και 7,3 g / l).

Ο δεύτερος τίτλος μέσο Ploskireva - J. Bacto-agar στην σύνθεση είναι παρούσα σε μία ποσότητα από άγαρ, 6,94 g / l. Seriovatistokislogo άνυδρο περιεκτικότητα νατρίου ίση με 5,1 g / l. Υπάρχει η παρουσία άνυδρου φωσφορικού δινατρίου - 2,1 g / l, άλατα νατρίου του χολικού οξέος περίπου 3,46 g / l και ανθρακικού νατρίου - 2,4 g

Λιγότερο από ένα γραμμάριο περιέχονται σε αυτήν δείκτες - ουδέτερου ερυθρού (0.05) και λαμπρό πράσινο (0.0002). Η περιεκτικότητά του σε ιώδιο - 0.13.

εφαρμογή

Η μελέτη των βιοχημικών διεργασιών των βακτηρίων παίζει έναν πολύ σημαντικό ρόλο στη διάγνωση των ασθενειών που προκαλούν αναερόβιους οργανισμούς. Είδη σε αυτή την οικογένεια - εκατοντάδες. Είναι σχεδόν ταυτόσημοι σε μορφολογία και πολιτιστικές ιδιότητες, και πιο αξιόπιστος τρόπος για να ξεχωρίζουν από κάθε άλλο - είναι η μελέτη της βιοχημείας.

Η μελέτη ξεκινά με τον εμβολιασμό των παθολογικών υλικού εντός του μέσου καλλιέργειας. Εκείνη παθολογική απόκλιση για κολοβακτηρίδια και ένα μέρος της, εκτός από την πεδιάδα άγαρ, περιλαμβάνει φως και λακτόζη. ικανότητα Επεξεργασία της λακτόζης - ένα σημαντικό σημάδι της διαφοροποίησης των εντεροβακτηριδίων. Εάν αυτό ανακαλύπτεται, το ρΗ μετατοπίζεται προς οξύτητα και η ένδειξη ενεργοποιείται, η οποία μετατρέπει την αποικία.

Άλλες χώρες μπορούν να χρησιμοποιούν και άλλα θρεπτικά συστατικά μέσα μαζικής ενημέρωσης, αλλά ο μηχανισμός δράσης τους αντιστοιχεί στα τρία πιο συνηθισμένα στη Ρωσία - αυτό το περιβάλλον Ενδο και Levine Ploskireva Τετάρτη.

Περιγραφή της μεθόδου

Εξωτερικό Ploskireva ανάλογο μέσο είναι ένα λεγόμενο Άγαρ MacConkey. Σε διαφανές διάλυμα τελική του μορφή έχει ένα ανοικτό ροζ-κίτρινο χρώμα. Αποικίες σε θέση να επεξεργάζονται λακτόζη, μεταξύ Ploskireva δώσει ερυθρό (cranberry) χρώμα. Εάν τα βακτήρια δεν μπορούν να το επεξεργαστεί, ή αποικία είναι άχρωμο ή έχει ένα ασθενές χρώμα.

Δεδομένου ότι η σύνθεση του μέσου περιλαμβάνει αναστολείς ουσίες Ploskireva (λαμπρό πράσινο, χολικά άλατα, ιώδιο), είναι αναστέλλει σχεδόν πλήρως την ανάπτυξη των θετικών κατά gram χλωρίδα, όπως στην πρώτη ημέρα eshehiry καθυστερεί σημαντικά την ανάπτυξη, καθώς επίσης και άλλες συνήθεις ταυτόχρονη μικροχλωρίδα.

δεύτερο πόδι

Περαιτέρω ενδιαφέροντος είναι η επιλογή της αποικίας, και σπείρεται σε ένα πρωτεύον μέσο αποθήκευσης και διαφοροποίηση. Περιβάλλον στο οποίο υπάρχει σπορά πρέπει να περιέχει πολλαπλά υποστρώματα. Βακτηριακής καλλιέργειας θα πρέπει να ανιχνεύει την ενζυματική δραστικότητα σε σχέση προς τους, στο ίδιο μέσο τοποθετούνται στους σωλήνες έτσι ώστε να υπάρχουν δύο θέσεις:

• μία στην οποία το άγαρ κλίση?
• με μία στήλη.

Το ενδιαφέρον των ερευνητών στην αποικία κατοικείται λοξή τμήμα πυκνά εγκεφαλικό επεισόδιο και σε μια στήλη - ένα τσίμπημα. Σε αυτό το στάδιο, το μέσο που χρησιμοποιείται Russell, Kligler ή Olkenitskogo. Όπως διαφορικής διάγνωσης και Ploskireva Τετάρτη.

Μικροβιολογία και παθογόνους οργανισμούς

Άγαρ Ploskireva είναι ένας σημαντικός παράγοντας για την ανίχνευση λοιμώξεων που προκαλούνται από Enterobacteriaceae. Έτσι, για παράδειγμα, το προϊόν έχει παραχθεί και διαφοροποιείται αποικίες των μικροοργανισμών που προκαλούν βακτηριακή δυσεντερία. Αυτή η αναερόβια οργανισμούς που ανήκουν στο γένος Schigella.

Όπως όλοι όσοι είναι μέρος μιας οικογένειας των εντερικών βακτηρίων, Shigella έχουν τη μορφή ράβδων, το μέγεθος των δύο μικρόμετρα. Δεν αποτελούν οι κάψουλες και τα σπόρια έχουν μαστίγια - τους επιτρέπει να διακρίνεται από σαλμονέλα, η οποία, με τη σειρά του, είναι κινητά. Αναπτύσσονται καλά σε πιο απλό μέσων, σε μια θερμοκρασία ελαφρώς άνω του περιβάλλοντος (35-37 ° C) και 7,4 ρΗ. Λόγω της φύσης της ανάπτυξης, οι αποικίες δεν διαφέρουν από σαλμονέλα.

Όπως συζητήθηκε παραπάνω, μικροοργανισμοί μπορεί να είναι ουσιαστικά μορφολογικές διαφορές, ωστόσο, διαφέρουν σημαντικά σε βιοχημικές διεργασίες της ζωής. Έτσι, εκτός από τα Shigella Nyukestl, χωρίς τον σχηματισμό του οξέος αερίου λαμβάνει χώρα κατά τη διάρκεια της ζύμωσης των υδατανθράκων. Με την εξαίρεση των Shigella sonnei, δεν μπορούν να ζυμώσουν τη λακτόζη, αλλά χωνεύεται γλυκόζη. Ακριβώς για να βασικά χαρακτηριστικά τους, μπορείτε να τους μεταφέρει ό, τι μπορούν για να μειώσουν niraty σε νιτρώδη. αποικίες τους υποβλήθηκαν σε πέψη με ουρία, καθώς και στο μέσο καλλιέργειας δεν είναι υγροποίηση της ζελατίνης.

Συλλογή και προετοιμασία των σπόρων

Στην ανίχνευση παραγόντων της δυσεντερίας, απαιτούνται μικροβιολογικές δοκιμές μολυσμένο περιβάλλον, δηλαδή κόπρανα ασθενούς. Μετά την παραλαβή του υλικού, θα πρέπει να έχετε όσο το δυνατόν γρηγορότερα για να κάνουν τη σπορά. Εάν αυτό δεν είναι δυνατό, η πηγή πρέπει να τοποθετηθεί σε ένα συντηρητικό - φωσφορικό ρυθμιστικό μίγμα ή γλυκερόλη. Στους 4 ° C, μπορούν να αποθηκευτούν για περισσότερο από μια ημέρα. Συλλέξτε το υλικό πρέπει να πραγματοποιείται με τη βοήθεια ενός ορθού γυάλινο σωλήνα ο οποίος εισάγεται μέσα στον πρωκτό.

Για μελέτες από ένα υλικό επιλεγμένο κομμάτια πυώδους βλέννης που πρέπει να πλένονται σε δύο έως τρεις σωλήνες διάλυμα χλωριούχου νατρίου ισοτονικό.

Εφαρμογή των παθογόνων βακτηρίων στο περιβάλλον Ploskireva γυαλί σπάτουλα. Θα πρέπει να τρίψετε σε ένα μικρό τμήμα του άγαρ του, στη συνέχεια κόψτε το σπάτουλα για το περιβάλλον, και το απομένον υλικό τρίβεται στο σπαρεί επιφάνεια. Αν η σπορά γίνεται σε μερικά φλιτζάνια, τότε σε καθένα από αυτά πρέπει να φυτέψει μια νέα παρτίδα.

Αν τα κομμάτια βλεννογόνο πυώδη εκεί στην ανάληψη ενός ειδικού ανάλυση, αυτό δεν σημαίνει ότι δεν υπάρχει παρουσία παθογόνων. Σε μια τέτοια περίπτωση, είναι αναγκαίο να γαλακτωματοποιήσει περιττώματα σε 10 ml διαλύματος χλωριούχου νατρίου (συγκέντρωση 0.85%) και στη συνέχεια να σπείρουν ένα ή δύο σταγόνες σε ένα μέσο Ploskireva. Μη γαλακτωματοποιημένα καρέκλα μπορεί να σπαρθεί σε selenitovy ζωμό. Επίσης χρησιμοποιείται, αν, αντί για τα περιττώματα είναι να κάνει εμετό ή πλύσεις.

μικροβιολογική διάγνωση

Κατά το πρώτο στάδιο της μικροβιολογικές μελέτες που έχουν πραγματοποιηθεί σποράς των παθογόνων βακτηρίων σε δύο κύπελλα, στη συνέχεια, να παρακολουθήσετε πώς να αυξηθεί Shigella. Την Τετάρτη Ploskireva που παράγεται σε καλλιέργεια, και το δεύτερο - για το περιβάλλον ή Endo Levin.

Λόγω του γεγονότος ότι υπήρχαν στελέχη Shigella είναι ανθεκτικά σε αντιβιοτικά, για να το μέσο συμπληρώθηκε με χλωραμφαινικόλη. Στη συνέχεια, λαμβάνει χώρα εντός ημερών επώασης σε έναν επωαστήρα στους 37 ° C.

Τη δεύτερη μέρα για να εξερευνήσετε τα μεγαλώσει αποικίες. Εκείνοι που δεν είναι στο διαγνωστικό μέσο διαφορικό αυξηθεί άχρωμο, είναι απαραίτητο να απομακρύνετε τις μεσαίες ή μικρές Ράσελ «ετερόκλητη σειρά.» Περαιτέρω έρευνα διεξάγεται από τον αλγόριθμο των πρωτογενών καλλιεργειών τους. Αποικίες της Shigella την Τετάρτη Ploskireva αναπτύσσονται με τη μορφή διαφανή, άχρωμα και μικρές στήλες. Αυτοί είναι δύο ειδών:

• πεπλατυσμένο με ακμές?
• στρογγυλεμένες, κυρτή, με ένα τυπικό υγρό λάμψη.

Τρεις ή τέσσερις αποικίες πρέπει να mikroskopirovat και εξετάζονται για την κινητικότητα. Αν ο τελευταίος δεν εμφανιστεί, θα μεταφερθεί την Τετάρτη Olkenitskogo να απομονώσει μια καθαρή καλλιέργεια. Σε περίπτωση απουσίας του χαρακτηριστικού αποικιών Shigella ή αν καμία αύξηση παρατηρείται καθόλου, είναι απαραίτητο να άγαρ Endo ή Ploskireva προϊόντα σποράς ζωμού selenitovogo. Αν οι τυπικές αποικίες υπάρχουν σε επαρκείς αριθμούς, βάλτε το εκτιμώμενο συγκόλλησης. Ένα μίγμα ορών sonnei και Flexner, αντίδραση λαμβάνει χώρα στη γυάλινη επιφάνεια.

περαιτέρω έρευνα

Την τρίτη ημέρα, υπάρχουν αλλαγές που έχουν επέλθει στις αποικίες στο μέσο του Russell. Εάν υπάρχει μια κουλτούρα που να μην υποβιβάζει την λακτόζη και γλυκόζη ζυμώνει για να παραχθεί ένα οξύ, αυτό διαχωρίζεται και αναλύεται, περνούν μικροσκοπία, καθώς επίσης και τη διεξαγωγή σπορά στο «ετερόκλητο σειρά,» αλλά αυτή τη φορά επεκτάθηκε. Απλά βάλτε την αντίδραση συγκόλλησης, προκειμένου να ορολογική ταυτοποίηση.

Την τελευταία ημέρα, μπορεί να εξαχθεί το συμπέρασμα, βάσει των αλλαγών στο «ετερόκλητο αριθμό» (αν υπάρχει ζύμωση των υδατανθράκων), καθώς και συνοψίζει την αντίδραση συγκόλλησης.

Αποθήκευση και προετοιμασία

Παρασκευή του άγαρ Ploskireva λαμβάνει χώρα ως εξής:

1. 55 g ξηράς ουσίας αναδεύεται σε ένα λίτρο απεσταγμένου νερού.
2. Έβρασε για δύο έως τρία λεπτά μέχρις ότου το άγαρ δεν έχει λιώσει ακόμη πλήρως.
3. Χύστε σε δίσκους petri (στειρότητα προαιρετικά) στρώμα του 5-6 mm.
4. Οι πλάκες αφήνονται ανοικτές για μισή ώρα σε θερμοκρασία δωματίου (18-25 βαθμούς). Μετά το διάστημα αυτό το μέσο είναι επαρκώς σκληραίνουν και ξηρό.

Τετάρτη Ploskireva φωτοευαίσθητες και υγροσκοπικό. Η σκόνη θα πρέπει να αποθηκεύονται σε μια σφραγισμένη συσκευασία, η σχετική υγρασία στο δωμάτιο δεν πρέπει να υπερβαίνει το 60%. Η βέλτιστη θερμοκρασία για την αποθήκευση των 2 ° C έως 25 ° C. Αποθήκευσης πρέπει να συμμορφώνονται με τους κανόνες αυτούς, αλλιώς είναι δυνατόν ανακριβείς διαπιστώσεις.